逆转录酶试剂套装 RScript™

染色用于cDNA合成

该试剂盒是基于 RScript II 逆转录酶开发的，它使用具有茎环结构的反转录引物与 miRNA 分子的 3' 端结合。在 RScript II 逆转录酶的作用下，可获得人工拉长的 miRNA 第一链 cDNA。推荐的一般茎环序列为 5'-GTCGTATCCAGTGCAGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGAC-3' ；也可根据实验需要选择其他茎环序列。一般来说，反转录引物只需在 miRNA 的 3' 端与茎环序列添加 6 个反向互补碱基即可。这种方法特异性强，只对成熟的 miRNA 进行反转录，不受其前体的干扰。可准确区分具有高度同源序列的 miRNA。本产品获得的反转录产物可直接用于随后的染料或探针定量检测。 RK004-0050 的灵敏度测试 以不同浓度（1000 毫微克、100 毫微克、10 毫微克、1 毫微克、0.1 毫微克、0.01 毫微克）的 Hela 细胞 RNA 为模板，针对 has-mir16-5p 基因对 RK004-0050 进行了测试。扩增曲线显示灵敏度低至 10 pg 总 RNA RK004-0050 对不同来源模板的扩增性能 (A) Hela 细胞 RNA (B) 小鼠 RNA RK004-0050 以不同浓度（1000 毫微克、100 毫微克、10 毫微克、1 毫微克、0.1 毫微克）的 Hela 细胞 RNA 和小鼠 RNA 为模板。各种 miRNA 的扩增曲线显示，Human-U6、has-mir16-5p、has-mir221-3p、Mouse-U6、mmu-mir-5p、mmu-mir24-3p 等的扩增效果非常好。