超纯 dUTP(2´-脱氧尿苷,5´-三磷酸)以钠盐形式在纯水(pH 8.5)中供应。在 PCR 和 RT-PCR 方案中,dUTP 可代替 dTTP,以防止先前扩增的携带。在 PCR 中用 dUTP 替代 dTTP 可得到含尿嘧啶的 PCR 产物,适用于大多数标准应用。可在 PCR 预混料中加入尿嘧啶-N-糖基化酶(UNG,也称 UDG),从任何污染的 PCR 产物中切除尿嘧啶,从而防止假阳性。每批 dUTP 都经过测试,以确保 DNA 扩增的特异性和不含核酸酶活性。
特点
适用于 PCR 扩增和 cDNA 合成
不含核酸酶和核糖核酸酶
应用
避免 PCR 之间的携带污染,消除假阳性的来源。
制备注意事项
工作溶液:我们建议制备含有 dATP、dCTP、dGTP(各 10 mM)和 dUTP(20 mM)的脱氧核苷酸混合物;(例如,制备 100 μl 核苷酸混合物时,在 50 μl PCR 级水中加入 10 μl dATP、dCTP、dGTP(各 10 mM)和 20 μl dUTP)。
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