HTRF 人 IFN-β 检测试剂盒是专为检测和定量细胞上清液中的人 IFN-β 而设计的免疫测定,采用均相格式(无需水洗步骤,无需分离步骤)。
试剂盒概述
Ⅰ型干扰素、α干扰素(IFN-α)和β干扰素(IFN-β)在对病毒感染的先天性免疫反应中起着至关重要的作用。IFN-β 基因的表达受 IRF-3、c-Jun/ATF-2 和 NF-kappaB 等转录因子的控制,这些转录因子位于模式识别受体(如 Toll 样受体)的下游。特别是,IFN-β 是 cGas-cGAMP-STING 通路激活的主要功能读数。一旦分泌,IFN-β 就会结合并激活 IFNAR1/IFNAR2 受体复合物,该复合物依赖于 STAT1/2 转录因子。磷酸化的 STAT1/2 会诱导抗病毒基因的表达。
评估血清样本通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA 检测法的灵敏度足以检测血清或血浆中的低水平分析物。
检测原理
将细胞上清、样品或标准品直接分装到检测板中,用 HTRF® 试剂(384 孔低容量白板或 Revvity 低容量 96 孔板,20 µL)进行检测。标记有 HTRF 供体和受体的抗体经过预混合,只需一次分装即可加入,从而进一步简化了检测程序。只需按比例调整每个添加量的大小,就可将检测程序扩展到 1536 孔格式。
化验数据分析
通常推荐使用 4 参数逻辑(4PL)曲线来拟合 ELISA 标准曲线。
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