葡萄糖摄取快速诊断套装 Uptake-Glo™

医学研究用于癌症糖尿病

均质法 灵敏度高、线性范围宽 可靠，重复性好 简单、非放射性葡萄糖摄取检测 Glucose Uptake-Glo™ Assay是一种非放射性的、 基于培养板的、均相生物发光检测系统， 用于检测哺乳动物细胞的葡萄糖摄取。试剂盒基于对2-脱氧葡萄糖-6-磷酸(2DG6P)的检测。 传统放射性葡萄糖摄取方法和Glucose Uptake-Glo™ Assay 的比较 向细胞加入 2- 脱氧葡萄糖 (2DG) 后， 2DG 被转运进入细胞并迅速发生磷酸化 ( 磷酸化方式同葡萄糖 ) 生成 2DG6P。但是，那些能够进一步修饰葡萄糖 -6- 磷酸 (G6P) 的酶却无法修饰 2DG6P，因此这种不能穿过细胞膜的被检测物便在细胞内聚集。经过简短的孵育，加入酸性去污剂 (Stop Buffer) 裂解细胞、终止摄取并破坏细胞内的 NADPH，再加入高pH 值的缓冲溶液 (Neutralization Buffer) 中和酸性溶液。之后，将含有葡萄糖 -6- 磷酸脱氢酶 (G6PDH)、 NADP+、 Reductase( 还原酶 )、 Ultra-Glo™ Recombinant Luciferase 和 proluciferin 底物的Detection Reagent 加入样品孔。 G6PDH 氧化 2DG6P 生成 6- 磷酸脱氧葡萄糖内酯 (6PDG)，同时将 NADP+ 还原为 NADPH。 Reductase 利用 NADPH 将 proluciferin 转化为 luciferin， luciferin 随即被 Ultra-Glo™ Recombinant Luciferase 利用产生发光信号，发光信号与 2DG6P 的浓度成正比。