为具体研究问题的功能分析铺平道路。
预期用途
本 FluoroSpot Path 试剂盒用于使用 FluoroSpot 检测法枚举对 SARS-CoV-2 (RBD) 反应分泌人类 IgG 的 B 细胞。也可对分泌 IgG 的 B 细胞进行计数,无论其抗原特异性如何(总 IgG)。仅供研究使用。不适用于诊断程序。
对于记忆 B 细胞,我们建议使用 R848 和重组人 IL-2(均包括在内)进行预刺激。
性能
将 COVID-19 康复者的人 PBMC 在有 R848+IL-2(刺激记忆性 B 细胞)或没有 R848+IL-2(刺激记忆性 B 细胞)的试管中培养三天。然后大量清洗细胞并将其加入涂有抗人类 IgG mAbs 的荧光斑点板(200,000 个细胞/孔)上。用 RBD-WASP(即带有 WASP 标记的重组受体结合域蛋白)检测 RBD 特异性斑点,然后用抗 WASP-640 检测。用 Mabtech IRIS 对斑点进行分析。
分析物描述
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免疫球蛋白 G(IgG)是血清中最丰富的 Ig 同工型,约占所有血清免疫球蛋白的 80%。人类的免疫球蛋白 G 有四个亚类,血清中 IgG1 的浓度最高,其次是 IgG2、IgG3 和 IgG4。在小鼠中,IgG 亚类被定义为 IgG1、IgG2a/c、IgG2b 和 IgG3。IgG 分子由两条重链和两条轻链(κ 或 λ)组成,从而形成一个具有两条抗原结合臂的分子。在典型的抗原免疫反应中,在最初的 IgM 反应之后会诱导出高水平的 IgG 抗体。
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