血清铁与转铁蛋白结合,但只有三分之一的结合能力是饱和的。转铁蛋白的不饱和结合能力或残余结合能力(RBC)表明血清结合受体的可用性。当过量的 Fe3+ 完全饱和时,血清转铁蛋白可结合的铁量即为总结合能力(TFC)。该方法首先用过量的 Fe3+ 使转铁蛋白饱和,然后测量总结合能力。过量的铁会被碳酸镁吸附,一旦结合过程完成,就会被离心除去,然后测定上清液中的铁含量。得出的数据与 CFT 相对应。在测定转铁蛋白结合率的同时测定血清铁,并将结果从转铁蛋白结合率值中减去,差值即为自由结合能力(FBC)或未与铁结合的血清转铁蛋白。
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