T7高产RNA合成试剂盒优化了转录反应体系。该试剂盒可以通过使用T7 RNA聚合酶,以T7启动子序列的线性双链DNA为模板,NTPs为底物,控制启动子下游的DNA序列,高效地合成单链RNA。在转录过程中,可将修饰的核苷酸加入底物中,以制备生物素或染料标记的RNA。
本试剂盒可以合成长的转录本和短的转录本,1μg的DNA模板输入就可以产生100-200μg的RNA。转录合成的RNA可用于各种下游应用,如RNA结构和功能研究、RNase保护、探针杂交、RNAi、微量注射和体外翻译。
特点
从1μg的对照模板中,每个反应最多可获得180μg的RNA
优化了IVT过程的反应系统
减少dsRNA的产生
更高的RNA完整性和纯度
常见问题。
1.转录本产量低
模板的质量与产量密切相关。如果实验组的产量明显低于对照组,可能的原因是。
① 实验模板含有抑制性成分。
模板有问题;②模板有问题。
建议。
重组模板。
确定模板的定量及其完整性。
延长反应时间。
增加模板的输入量。
尝试其他启动子和RNA聚合酶。
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