使用微型自旋柱从最多 5 毫升细菌培养物中分离出低内毒素(<1EU/µg)质粒 DNA
概述
使用传统纯化程序分离的质粒通常含有大量内毒素(也称为脂多糖或 LPS),会严重干扰下游的转染实验。高拷贝数质粒最多可使用 5 mL 过夜培养物,低拷贝数质粒最多可使用 10 mL 过夜培养物。
E.Z.N.A.® Endo-Free ...smid Mini Kit I 将高效的内毒素去除步骤整合到质粒纯化程序中,生产出高质量的转染级(<0.1 EU/µg)质粒,实现高效转染。细菌细胞采用碱性-SDS 裂解法进行裂解。然后用 ETR 试剂处理清除细胞裂解物,以有效去除内毒素。调整结合条件后,将细胞裂解液注入 HiBind® DNA 柱,纯化的 DNA 从柱膜上洗脱下来。
快速 - 30 分钟或更短
安全--无需酚/氯仿提取
多用途--可采用自旋和真空形式
高质量 - 有效减少内毒素(<0.1 EU/µg)
规格
特点 - 规格
下游应用 - 敏感细胞系转染;基因治疗等。
起始材料 - 1-5 mL LB 培养液,OD600 介于 2 和 3 之间;或同等物质
质粒类型 - 高拷贝、低拷贝、宇宙 DNA
处理方式 - 手动、离心
处理量 - 1 - 24
DNA 结合技术 - 微型硅胶旋转柱
裂解物清除方法 - 离心
处理时间 - <30 分钟
产量 - 高拷贝数为 15-25 微克;低拷贝数为 0.1-5 微克
其他 - 包括内毒素去除步骤
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