外周血中单核细胞(淋巴细胞和单核细胞)的密度在 1.075-1.090g/ml 之间,与红细胞、多核白细胞和血小板的密度不同。红细胞和粒细胞的密度相对较大(约 1.092g/ml),血小板的密度在 1.030~1.035g/ml 之间,因此使用人淋巴细胞分离培养基可产生一定的密度梯度,稀释后的全血可顺利地铺在分离培养基上。离心后,红细胞和粒细胞因密度大而沉入管底;淋巴细胞和单核细胞因密度小于或等于分离培养基的密度而位于分离培养基的表面。也可能有少量细胞悬浮在分离培养基中。通过吸取分离培养基表面的细胞,可以从外周血中分离出单核细胞。
该系列产品具有使用简单快捷、无细胞毒性、细胞产量高、活力好等一系列优点。
故障排除
最佳分离温度为 (20±5)℃,超过此温度将影响分离效果。使用前将分离培养基预热至室温(20±5℃)并轻轻摇匀。避免直接从冰箱中使用分离培养基。
对于分离培养基,用于稀释抗凝血的等渗培养基(PBS 或 0.9% NaCl)应无菌,可用 RPMI-1640 培养基代替。
1:1 的血液稀释可减少红细胞的凝集,增加淋巴细胞的收获量。
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