用于制备光学显微镜下的细胞组织学样本的产品。
应用范围
人体骨骼肌 8 微米的冷冻切片。显示酸性磷酸酶的酶活性。
酸性磷酸酶存在于巨噬细胞和溶酶体中,可识别坏死和再生。
原理 结果 萘酚酸性磷酸被组织中的酸性磷酸酶水解,产生萘酚衍生物。萘酚衍生物与一种不稳定的重氮盐--六氮对氨基苯胺--偶联,生成一种红色偶氮染料,用于标记酶的活性位点。
方法
1) 建议让试剂达到室温后再开始操作。
2) 在酸性磷酸酶固定液(Bio-Optica 代码 30-30120)中切片,10 分钟
3) 在空气中干燥,10 分钟
4) 配制孵育液: - 将试剂 B 加入试剂 C 中,振荡 5-10 秒,静置 1 分钟。 - 将试管 A 中的内容物放入试剂 D 中,振荡 5-10 秒。 - 将 B+C 溶液加入 A+D 溶液中。摇动 5-10 秒。
5) 将切片置于 37°C 孵育 45 分钟。
6)用蒸馏水冲洗,10 分钟
7) 甲基绿(Bio-Optica 代码 30-30119),5 分钟
8)用蒸馏水冲洗
9) 装入水性装片介质。或者通过酒精快速脱水至二甲苯,然后装入树脂装片介质中。
酸性磷酸酶酶活性阳性:红色
结果
背景和细胞核:绿色
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