缓冲溶液试剂 FOCUS™

电泳蛋白质尿素

在进行二维凝胶电泳之前，最重要的考虑因素之一是蛋白质增溶缓冲液的选择。一个合适的缓冲液必须能有效地溶解蛋白质，而不干扰蛋白质的原始电荷。 尿素，一种常见的变色剂，被广泛用于蛋白质的溶解和变性。使用尿素的缺点之一是氨甲酰化。在水中，尿素与氰酸铵平衡存在，其含量随着温度和pH值的增加而增加。氰酸盐与蛋白质的α-氨基和ε-氨基反应，诱发蛋白质等电点的改变。这导致了伪装的结果。因此，必须避免氨甲酰化。 将氨甲酰化的风险降到最低的一个方法是在每次使用前新鲜制备尿素类试剂。G-Biosciences已经开发了一系列干燥的、以尿素为基础的、预混合的、可随时使用的增殖缓冲液。只需在干燥的缓冲液中加入适当体积的所提供的再水化缓冲液。然后用于溶解蛋白质，节省时间并提高IEF/2D凝胶电泳的质量（正在申请专利）。 FOCUS™提取缓冲液也可作为IPG条带的复水缓冲液使用。 FOCUS™提取缓冲液是经过实验优化的关键、缓冲和稳定剂的浓度，包括尿素、硫脲、Nonidet® P-40、CHAPS和磺基蛋氨酸。FOCUS™ 提取缓冲液的设计是为了在二维凝胶分析中产生最佳的蛋白质提取和提高斑点分辨率。