2× Plus Mix 是一种预混合的即用型溶液,含有最佳浓度的 Taq Plus DNA 聚合酶、dNTPs、Mg2+ 和反应缓冲液,用于通过 PCR 高效扩增 DNA 模板,只需添加引物和模板 DNA 即可。这种预混配方节省了 PCR 设置所需的移液步骤,从而节省了时间并减少了污染。它还通过添加增强剂提高了灵敏度。
Taq Plus DNA 聚合酶由 Taq 和 Pfu 两种恒温 DNA 聚合酶组合而成,融合了 Taq 的处理能力和 Pfu 的高保真能力。因此,与单酶配方相比,这种特殊配方的 Taq Plus DNA 聚合酶能扩增更高的保真度和更长的模板。它也是扩增复杂模板(如富含 GC 的模板)的更好选择。其延伸率为 3kb/分钟。它可扩增长达 20 kb 的 DNA 目标物(简单模板)。Taq Plus 扩增的 PCR 产物是钝末端和 3' dA 悬垂的混合物。
2× Plus 混合液的组成
0.4U/μl Taq DNA 聚合酶、0.04U/μl Pfu DNA 聚合酶、2× PCR 缓冲液、0.4mM dNTPs、4mM MgSO4、0.02% 溴酚蓝。
Plus Mix 缓冲液是一种专有配方,经过优化,在 PCR 中性能稳定。
应用
- 高保真长 PCR
- 复杂模板的高重现性 PCR
- 针对复杂模板的高通量 PCR
- 生成用于 TA 克隆的 PCR 产物
特点
- 方便:只需添加引物和模板 DNA
在准备最终 PCR 时
- 高效:简化流程,节省时间
- 可重复性:降低污染和移液错误风险
---