蛋白酶K试剂 N9016

蛋白酶稀释缓冲液用于研究

蛋白酶 K 是一种内溶性蛋白酶，能切割脂肪族、芳香族或疏水氨基酸羧基上的肽键。蛋白酶 K 被归类为丝氨酸蛋白酶。这种酶水解的最小肽是四肽。 特点 - 重组蛋白酶 K - 在多种反应产物中具有活性 应用 - 从培养细胞和组织中分离基因组 DNA - 从组织或细胞系中分离 DNA 和 RNA 时，去除 DNases 和 RNases - 确定酶的定位 - 提高 PCR 产物的克隆效率 来源 来自带有克隆基因的酵母细胞，该基因编码基因工程 Engyodontium album（Tritirachium album）内溶蛋白酶。 分子量 29.3 kDa 单体。 活性单元的定义 以变性血红蛋白为底物，在 37 摄氏度、pH 值为 7.5 的条件下，1 单位的酶可在 1 分钟内释放出相当于 1 µmol 酪氨酸的 Folin 阳性氨基酸和肽。 在以下混合物中检测酶活性： 0.08 M 磷酸二氢钾（pH 7.5）、5 M 尿素、4 mM NaCl、3 mM CaCl2 和 16.7 mg/ml 血红蛋白。 制备说明 可在稀释缓冲液[20 mM Tris-HCl（pH 7.4），1 mM CaCl2]或[20 mM Tris-HCl（pH 7.4），1 mM CaCl2，2% Glycerol]中配制 40-80mg/ml 的储备液，使用 0.22μm 过滤器灭菌，并在 50% Glycerol 中以 20-40mg/ml 的最终浓度供应。 抑制和灭活 抑制剂：蛋白酶 K 不会被金属螯合剂、硫醇反应试剂或特异性胰蛋白酶和糜蛋白酶抑制剂灭活。苯甲基磺酰氟和氟磷酸二异丙酯可完全抑制该酶。