离子流动性光谱仪 timsTOF HT

质谱飞行时间用于细胞培养

timsTOF HT 采用全新的第四代 TIMS-XR 和更先进的数字转换技术，能够在细胞和组织的定量蛋白质组学分析中，实现更宽的动态范围和更高的蛋白覆盖深度。 速度 timsTOF HT 使用的 PASEF® 技术能够实现在不影响分辨率和灵敏度的情况下达到超过 150 Hz 的扫描速度。 耐用性 独特的仪器设计使得其可以连续分析数千个样品，仪器保持稳定的性能而无需清洁。 灵敏度 第四代 TIMS-XR 的超大离子容量极大提升了分析深度 选择性 在四极杆和飞行管之前提供额外一维淌度分离，大大提升了峰容量。 捕集型离子淌度分离，支持 CCS 值分析 全新的 timsTOF HT 质谱仪整合了第四代超高离子容量的 TIMS-XR 分析器和更先进的数字转换技术。新的设计为无与伦比的蛋白质组学分析深度和高通量定量分析提供了更宽的动态范围。timsTOF HT 提供全面的 CCS 值辅助分析，并支持所有基于平行累积连续碎裂技术（ PASEF® ）的数据采集模式，PASEF®、dia-PASEF® 和 prm-PASEF® 使得 4D-蛋白质组学分析拥有更高的灵活性，轻松实现蛋白质组的全覆盖。 针对心脏组织样本的快速蛋白质组学分析示例。通过 dia-PASEF® 和 30 分钟短梯度色谱分离，对不同样本量的小鼠心脏组织蛋白酶解液进行三次重复分析。在进样量为 800ng 时，能鉴定到 4700 个蛋白，蛋白相对丰度跨越 5 个数量级。原始数据使用 DIA-NN 的非建库模式进行数据检索，蛋白拷贝数通过 ‘proteomics ruler’ 方法进行估算。 加大蛋白酶解液的进样量能够提高鉴定量，获得更高的蛋白覆盖深度。如图为使用 Aurora-25 cm 色谱柱，在 250nL/min 的流速下，通过 60 分钟色谱梯度洗脱，结合 timsTOF HT 质谱仪的 dia-PASEF®（ 100 毫秒淌度分离 ）数据采集模式对人类细胞系 K562 的胰酶消化液进行质谱分析结果。采集后的数据通过 TIMS DIA-NN 搜库分析，数据库为 uniprot 人源已注释蛋白。 timsTOF HT 的 dia-PASEF® 采集方式与 Biognosys 公司的 PQ500 稳定同位素标肽技术结合，对血浆蛋白质组进行靶向分析。在 30 分钟色谱梯度下，可以实现对 578 个蛋白（ 对应 804 条多肽 ）的准确定量，数据完整性超过 99%。该方法通过一个简单快捷的采集设置将传统 SMS/MRM 技术的选择性和灵敏度结合起来，并能够根据经验后续再进行新靶标的选择。