循环中的25-羟基维生素D(25-OH-D)被广泛认为是衡量维生素D状况的最佳指标。在血液循环中,两个主要的维生素D代谢物是25-OH维生素D3和25-OH维生素D2。 25-OH-D3主要来自皮肤中由阳光产生的维生素D3,而25-OH-D2则来自饮食中的植物。目前有两种主要的方法用于常规测量25-OH-D:基于色谱分离,然后进行非免疫学直接检测的方法和竞争性免疫测定法。大多数免疫测定法依赖于一种抗体,它可以同时检测25-OH维生素D2和25-OH维生素D3,并给出总的结果。但25-OHD2的检测比例是可变的。
目前有两种非免疫学的直接检测方法:高压液相色谱法(HPLC)和液相色谱-串联质谱法(LC-MS/ MS)。色谱法能够独立测量25-OH-D2和25-OH-D3,具有良好的准确性和敏感性。
另一方面,有许多科学研究和论文显示,如果不单独分离和测量维生素D2和维生素D3的代谢物,用商业免疫测定法测量总维生素D是不准确的。建议临床实验室的任何25-OH-D检测方法都应该同时测量25-OH-D2和25-OH-D3,以便报告25-OH-D的总数值。已评估的免疫测定法可测量总的25-OH-D(包括25-OH-D3和25-OH-D2),但不同方法与25-OH-D2和25-OH-D3的交叉反应从52%到100%不等。
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